5. Q：明確標明種屬的試劑盒可以用來檢測其他種屬的樣本么？

A：ELISA試劑盒嚴格區分種屬，一般不推薦跨種屬檢測，不同種屬的同一個指標同源性相差可能會很大，抗體的特異性要求比較高，不同種屬樣本與抗體結合能力會有很大差別。

6. Q：ELISA試劑盒只能檢測血清、血清、細胞上清液么？

A：通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的，可以是血清、血漿、細胞上清等常規樣品，也可以是尿液、細組織勻漿液、細胞裂解液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。樣品中含有影響生物活性的物質會影響檢測結果。

7. Q：試劑盒中的酶標板是包被好的么？

A：劑盒中提供的包被板已經包被過檢測抗體，可以直接使用。進行ELISA實驗時僅限使用本試劑盒中的組分，不能使用別的板條進行實驗。96孔酶標板是可拆的，每條8孔。可以根據自己的實驗取出部分板條使用，剩余的酶標板放回含有干燥劑的鋁箔袋中，4度保存，不會影響酶標板性能。若拆封的酶標板沒有正確儲存，導致板子受潮，可能會影響檢測結果。用過的板條不可重復使用。

8. Q：試劑盒在使用前要室溫放置30min ，目的是什么？

A：ELISA試劑盒對于溫度的要求比較嚴格，溫度是ELISA結合反應的重要影響因素，這樣做主要是為了使試劑溫度一致，在后面的溫育反應步驟中，能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度，以滿足測定要求。

9. Q：試劑盒保存溫度是多少度？為什么說明書上寫的標準品是-20度，標簽上寫的是4度呢？

A：試劑盒保存溫度是4度，說明書中只有標準品標注的保存溫度是-20度，由于標準品是凍干的重組蛋白，-20度保存會延長重組蛋白的保存期限。試劑盒的有效期是6個月，凍干的重組蛋白能夠在4度保存6個月，但是如果有條件或者想更長時間保存，還是建議能夠將標準品-20度保存。

10. Q：樣本收集后不能及時檢測低溫保存可以放多久？

A：樣本收集后24之內進行檢測，放在4度冰箱即可。如果樣本收集后不能立即檢測，需將樣本置于低溫冰箱中，樣本3個月內檢測可于-20度保存，若存放時間更久，需要用-80度冰箱保存。

11. Q：樣品反復凍融影響大么？

A：樣品反復凍融對蛋白影響非常大，能導致蛋白降解，非常不建議反復凍融樣品。一般蛋白含量豐富的樣本例如血清/血漿反復凍融1-2次，對于檢測結果影響不是非常大，但是其他類型的樣本，例如細胞上清液、肺泡灌洗液，反復凍融會使蛋白降解嚴重，對檢測結果影響非常大。

12. Q：生物素化抗體和酶結合物，稀釋后沒用完，還可以再用嗎？

A：稀釋后的生物素化抗體和酶結合物建議在當天用完，放置時間太長可能會影響其活性。可根據自己實驗所需用量進行配制，不建議過量配制。