水土中總磷酸鹽含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4215
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：濃硫酸10 mL自備。

2. 試劑二：每瓶臨用前加入15 mL蒸餾水溶解備用，溶解后2-8℃保存一周。

3. 試劑四：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存兩周。

4. 試劑五：臨用前加入5 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存兩周。

5. 標準品：臨用前加入1.4 mL下述稀釋液溶解粉劑，配成20μmol/mL的磷標準液，2-8℃保存兩周。

6. 稀釋液的配制：按蒸餾水體積（mL）：試劑一體積（mL）：試劑二體積（mL）=10:1:2的比例混合即可，現用現配。

7. 定磷試劑的配制：按H₂O：試劑四：試劑五：試劑六（V:V:V:V）=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液應為淺黃色。若變色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，工作液應現配現用。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產品說明：
總磷酸鹽包含正磷 酸 鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、多聚 磷酸鹽等各種磷酸鹽的形式，反應了水土中的磷酸鹽水平，是一個水質和土壤質量評價的重要指標。
在酸性溶液中，在分解劑和高溫條件下，將無機磷酸鹽和有機磷酸鹽水解成正磷 酸鹽，正磷 酸鹽可與鉬酸銨反應成磷鉬酸，在還原劑存在時被還原為磷鉬藍，在660nm處有特征吸收峰。
技術指標：
低檢出限：0.0075 μmol/mL
線性范圍：0.0098-5 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、30-50目篩、漩渦震蕩儀、研缽、EP管、蒸餾水、濃硫酸。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
1、定磷試劑應現配現用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。
2、加入試劑三后可能會產生絮狀沉淀，其對后續實驗無影響，加入定磷試劑后即自行消除。
3、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
實驗實例：

1. 取0.1g三葉草土，加入1mL蒸餾水，再加入100μL試劑一和200μL試劑二，離心取上清稀釋2倍，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.692-0.045=0.647，帶入標準曲線y=0.7001x+0.0078，得x=0.913，計算含量得：

土樣總磷酸鹽含量（μmol/g土樣）=1.3x÷W×2（稀釋倍數）=1.3×0.913÷0.1×2=23.74 μmol/g土樣。

1. 取0.1g林土，加入1mL蒸餾水，再加入100μL試劑一和200μL試劑二，離心取上清稀釋2倍，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.685-0.045=0.640，帶入標準曲線y=0.7001x+0.0078，得x=0.903，計算含量得：

土樣總磷酸鹽含量（μmol/g土樣）=1.3x÷W×2（稀釋倍數）=1.3×0.903÷0.1×2=23.49 μmol/g土樣。
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