北京索萊寶科技有限公司
專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC3045-100T/48S
更新時間：2024-04-16
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：818
010-50973130
產(chǎn)品分類
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土壤速效鉀含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC3045
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體70mL×2瓶 | 常溫保存 |
試劑一 | 液體3mL×1瓶（自備） | 常溫保存 |
試劑二 | 液體3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三A | 液體10.2mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三B | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 提取液：若有晶體析出，37℃水浴溶解即可。
2、 試劑一：自備，甲醛。
3、 工作液：臨用前在1瓶試劑三B中加入2.805mL試劑三A，充分溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用，用不完的試劑2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做37管樣本測定管試驗）。
4、 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說明：
速效鉀是土壤中易被植物吸收利用的鉀素，是表征土壤鉀素供應(yīng)狀況的重要指標(biāo)之一。及時測定和了解土壤速效鉀的含量及其變化，對耕地地力評價及對指導(dǎo)鉀肥的施用有著重要作用。
鉀離子與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的白色四苯硼鉀沉淀，產(chǎn)生的濁度在一定范圍內(nèi)與鉀離子濃度成正比，通過檢測其在420nm處的濁度來測定土壤速效鉀的含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、振蕩器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、30-50目篩、甲醛（不允許快遞）、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.2g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000rpm，25℃離心10min（若離心后上清中仍有雜質(zhì)，建議將上清再次離心，至澄清），取上清液待測。
二、測定步驟
1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至420nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
2、 臨用前將20 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋至1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液待測。
3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：
序號 | 稀釋前濃度（µmol/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 提取液體積（µL） | 稀釋后濃度（µmol/mL） |
1 | 20 | 100 | 900 | 2 |
2 | 2 | 120 | 80 | 1.2 |
3 | 2 | 500 | 500 | 1 |
4 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
5 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
6 | 1 | 80 | 120 | 0.4 |
7 | 1 | 60 | 140 | 0.3 |
8 | 1 | 40 | 160 | 0.2 |
備注：實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需要50μL標(biāo)準(zhǔn)液。
4、 在EP管或96孔板中進行以下操作（試劑一為有刺激性氣味的有毒物質(zhì)，建議以下試驗在通風(fēng)櫥中操作）：
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
樣本（μL） | 50 | 50 | - | - |
提取液（μL） | - | - | 50 | - |
標(biāo)準(zhǔn)液（μL） | - | - | - | 50 |
試劑一（μL） | 25 | 25 | 25 | 25 |
渦旋混勻，室溫靜置5min。 | ||||
試劑二（μL） | 25 | 25 | 25 | 25 |
工作液（μL） | 75 | - | - | 75 |
試劑三A（μL） | - | 75 | 75 | - |
試劑四（μL） | 25 | 25 | 25 | 25 |
渦旋混勻，室溫靜置5min，于微量玻璃比色皿或96孔板中測定420nm處吸光值，分別記為A測定、A對照、A空白、A標(biāo)準(zhǔn)。計算ΔA測定=A測定-A對照，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。空白管和標(biāo)準(zhǔn)曲線只需做1-2次。 | ||||
三、速效鉀含量計算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，μmol/mL）。
2、速效鉀含量計算：
速效鉀含量（mg/kg）=x×10-3 ×V樣總÷W×39=0.039x ÷W
10-3：單位換算系數(shù)，1μmol=10-3 mmol；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，kg；39：鉀離子的相對分子質(zhì)量。
注意事項：
1、 提取液剛從低溫（4℃）條件取出會有晶體析出，震蕩使其溶解即可。
2、 甲醛為有刺激性氣味的有毒物質(zhì)，建議本試驗在通風(fēng)櫥中操作。
3、 當(dāng)A測定大于1時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定，計算時需在公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)；當(dāng)A測定小于0.15時，建議適當(dāng)增加土壤樣本質(zhì)量或減少提取液重新提取后再進行測定。
實驗實例：
1、取0.2g土樣1加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.218-0.062=0.156，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7128x-0.0301，計算x =0.261μmol/mL，按樣本質(zhì)量計算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質(zhì)量)=0.039x ÷W=0.039×0.261÷0.0002=50.895 mg/kg質(zhì)量。
2、取0.2g土樣2加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.801-0.055=0.746。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7128x-0.0301，計算x =1.089μmol/mL，按樣本質(zhì)量計算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質(zhì)量)=0.039x ÷W=0.039×1.089÷0.0002=212.355 mg/kg質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0040/BC0045 土壤硝態(tài)氮含量檢測試劑盒
土壤速效鉀檢測試劑盒 土壤速效鉀檢測試劑盒
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