北京索萊寶科技有限公司
專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC0165-100T/48S
更新時間：2024-07-09
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1570
010-50973130
產(chǎn)品分類
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微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0165
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體5 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
| 試劑三 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)液 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目篩、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
二、測定步驟
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至400nm，分光光度計用蒸餾水調(diào)零。
用蒸餾水倍比稀釋：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L做標(biāo)準(zhǔn)液，可按下表稀釋。
標(biāo)準(zhǔn)液濃度稀釋表
| 序號 | 稀釋前濃度（μmol/L） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（μmol/L） |
| 1 | 1000 | 50 | 450 | 100 |
| 2 | 100 | 200 | 200 | 50 |
| 3 | 50 | 200 | 200 | 25 |
| 4 | 25 | 200 | 200 | 12.5 |
| 5 | 12.5 | 200 | 200 | 6.25 |
備注：試驗中需標(biāo)準(zhǔn)液70µL。
加樣表：
| 試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
| 風(fēng)干土樣（g） | 0.02 | 0.02 | - | - |
| 試劑一（μL） | 10 | 10 | - | - |
| 振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置15min | ||||
| 試劑二（μL） | 130 | - | - | - |
| 試劑三（μL） | 160 | 160 | - | - |
| 混勻，37℃水浴/恒溫培養(yǎng)箱1h后，立即沸水浴煮沸5min（蓋緊纏封口膜，防止水分散失），流水冷卻 | ||||
| 試劑二（μL） | - | 130 | - | - |
| 充分混勻，10000g常溫離心10min，取上清液 | ||||
| 上清液（μL） | 70 | 70 | - | - |
| 標(biāo)準(zhǔn)液（μL） | - | - | 70 | - |
| 蒸餾水（μL） | - | - | - | 70 |
| 試劑四（μL） | 130 | 130 | 130 | 130 |
充分混勻，室溫靜置2min后，測定400nm處吸光值A，計算ΔA測定=A測定管-A對照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)定管-A空白管。（每個測定管設(shè)一個對照管）
參考文獻(xiàn)：
Dick W A, Thavamani B, Conley S, et al. Prediction of β-glucosidase and β-glucosaminidase activities, soil organic C, and amino sugar N in reflectance spectroscopy[J]. Soil Biology & Biochemistry, 2013, 56(9): 9e104.
Sestelo A B F, Poza M, Villa T G. β-Glucosidase activity in a Lactobacillus plantarum wine strain[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2004, 20(6): 633.
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