儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
植物組織果糖含量測(cè)試盒糖代謝
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Plant Tissue Fructose Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC2450-50T/48S

更新時(shí)間：2024-07-09

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2424

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC2350
規(guī)格：10T/9S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	-20℃保存
試劑三	液體1.5 mL×1支	2-8℃保存
試劑四	液體1mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

提取液：內(nèi)含不溶物，使用前搖勻；
試劑二：臨用前加蒸餾水1mL充分溶解，未用完的試劑2-8℃可以保存2周；

產(chǎn)品說明：
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去酰基化反應(yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。

AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測(cè)定412nm吸光度增加速率，來計(jì)算AAT活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1、組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。4℃，15000 g離心20min，取上清液待測(cè)。
2、血清（漿）樣本：直接檢測(cè)。（若液體有渾濁則離心后進(jìn)行測(cè)定）
二、測(cè)定步驟

分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm，蒸餾水調(diào)零。
試劑一在37℃水浴保溫20min以上。
樣本測(cè)定：

試劑名稱（μL）	空白管	測(cè)定管
蒸餾水	100	-
上清液	-	100
試劑一（預(yù)熱）	700	700
試劑二	50	50
試劑三	100	100
試劑四	50	50

將上述試劑按順序加入1mL 玻璃比色皿中，加試劑四的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，充分吹打混勻，在412nm波長(zhǎng)下記錄第10s時(shí)的初始吸光度A1和130s后的吸光值A2，計(jì)算ΔA空=A2空-A1空、ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè)、ΔA=ΔA測(cè)-ΔA空。空白只需做1-2次。
三、AAT活性計(jì)算
1、按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1個(gè)酶活單位。
AAT (U/mg prot) =ΔA÷0.001÷(Cpr×V樣) ÷T= 5000×ΔA÷Cpr
此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每克組織每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1個(gè)酶活單位。
AAT (U/g 質(zhì)量) =ΔA÷0.001÷(V樣÷V樣總×W) ÷T=5000×ΔA÷W
3、按血清體積計(jì)算
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每mL血清每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1個(gè)酶活單位。
AAT (U/mL 血清) =ΔA÷0.001÷V樣÷T=5000×ΔA
Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL，需要另外測(cè)定；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.1mL；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2min。
注意事項(xiàng)：

當(dāng)吸光值大于1時(shí)，建議稀釋后測(cè)量。
如果ΔA測(cè)小于0.01，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，如測(cè)定10s和310s的吸光度，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改計(jì)算公式中反應(yīng)時(shí)間。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g腎臟加入1mL提取液進(jìn)行樣本處理，取上清后稀釋4倍后按測(cè)定步驟操作，測(cè)得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè)=0.665-0.479=0.186、ΔA=ΔA測(cè)-ΔA空=0.186-0.004=0.182，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：AAT (U/g 質(zhì)量) =5000×ΔA÷W×4（稀釋倍數(shù)）=36400 U/g 質(zhì)量。
取兔血清直接按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè)0.622-0.521=0.101、ΔA=ΔA測(cè)-ΔA空=0.101-0.004=0.097，按血清體積計(jì)算酶活得：AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.097=485 U/mL 血清。